使用者16053803366312021-11-15 09:39:13推薦在10~20μl反應體系中進行接反應，反應中DNA濃度最大可達1mM（1kbDNA約1mg/ml）。
首先混合要接的DNA片段，加入10× Ligase Buffer至終濃度為1×，再加入適量T4 DNA Ligase混勻。最適連線溫度為16℃。粘末端連線效率較高，加入0。2~1μl T4 DNA Ligase，可在室溫或16℃反應1~3小時完成反應；平末端連線效率較低，加入1μl T4 DNA Ligase，通常需要在16℃或4℃過夜完成反應。